分光光度計(jì)是利用分光光度法，通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類(lèi)的分光光度計(jì)的基本原理相似，都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源。光源透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，通過(guò)測(cè)量樣品的吸光值，經(jīng)過(guò)計(jì)算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn)：
首先，它所采用的制作材料是非常的，這就保證了它的高質(zhì)量。在檢測(cè)物質(zhì)的波長(zhǎng)的時(shí)候，這種儀器有著非常高的度。這樣，它所檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果跟實(shí)際情況當(dāng)然就會(huì)更加接近了，這對(duì)于生產(chǎn)部門(mén)保證產(chǎn)品質(zhì)量有非常重大的意義。
第二點(diǎn)就是分光光度計(jì)有著非常好的穩(wěn)定性，它所使用的是超大的集成電路，這樣的集成電路對(duì)機(jī)子運(yùn)作的穩(wěn)定性方面有很大的輔助作用。
第三點(diǎn)是分光光度計(jì)非常容易操作，一般的人員只要經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)人員的培訓(xùn)就可以非常自如地操作。
zui后一點(diǎn)是分光光度計(jì)的使用壽命很長(zhǎng)。包括紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)等。只要機(jī)子能得到妥善的保養(yǎng)，不惡意地進(jìn)行破壞，一般這種機(jī)子的壽命都比一般的儀器長(zhǎng)很多。更重要的是，機(jī)子使用壽命的延長(zhǎng)，在很大程度上還可以減少公司或者工廠的支出。
分光光度計(jì)時(shí)比較常用的也是比較簡(jiǎn)單的儀器設(shè)備。比如核酸的定量是使用分光光度計(jì)頻率zui高的。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類(lèi)型的核酸，事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如：1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測(cè)試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而，實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者zui頭痛的問(wèn)題。靈敏度越高的分光光度計(jì)，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
